HelixAmp™ Direct PCR [3G]는 동물의 조직, 전혈 및 식물 조직에서 별도의 DNA 추출없이 직접 PCR 증폭/검출할 수 있는 Taq 중합효소 기반의 direct PCR 제품입니다. 본 제품은 Taq DNA 중합효소, dNTPs, MgCl₂및 다양한 PCR inhibitor에 의한 영향을 방지해주는 특별한 buffer 시스템으로 구성된 2x Direct PCR Premix를 포함하고 있습니다. Pfu DNA 중합효소 유도체 기반의 다른 브랜드 Direct PCR 제품과 달리, 본 제품은 3'-5' exonuclease 기능이 없어 우수한 증폭 능력을 보유한 Taq 중합효소를 적용하여, allele specific PCR을 포함한 다양한 genotyping 분석에 적용할 수 있습니다. 또한, Pfu DNA 중합효소 기반 direct PCR 제품들과 달리, carryover contamination 방지를 위해 uracil-DNA glycosylase(UDG)/dUTP 시스템을 적용할 수 있습니다. 본 제품은 UDG/dUTP가 적용된 제품과 적용되지 않은 제품으로 구성되어 실험 목적에 따라 선택하여 사용할 수 있습니다. 

HelixAmp™ Direct PCR [3G] [Hot-start]는 antibody-mediated hot-start Taq DNA 중합효소(Ab+Taq)를 적용한 direct PCR 제품으로, Ab+Taq, dNTPs, MgCl₂및 다양한 PCR inhibitor에 의한 영향을 방지해주는 특별한 buffer 시스템으로 구성된 2x Direct PCR Premix를 포함하고 있습니다. Hot-start Taq DNA 중합효소는 낮은 온도에서는 항체에 의해 비활성화 상태이며, 이러한 특징으로 인해 PCR mixture 준비 과정이나 PCR cycle의 시작 단계에서 발생할 수 있는 비특이(non-specific) 증폭 및 primer dimer 형성을 방지해줍니다. 초기 변성(initial denaturation) 단계의 높은 온도에서 변성된 항체가 Taq 중합효소에서 분리되어, Taq DNA 중합효소가 활성화 됩니다. 본 제품은 3'-5' exonuclease 기능이 없어 우수한 증폭 능력을 보유한 Taq 중합효소를 적용하여, allele specific PCR을 포함한 다양한 genotyping 분석에 적용할 수 있습니다. 또한, Pfu 중합효소 기반 direct PCR 제품들과 달리, carryover contamination 방지를 위해 uracil-DNA glycosylase(UDG)/dUTP 시스템을 적용할 수 있습니다. 본 제품은 UDG/dUTP가 적용된 제품과 적용되지 않은 제품으로 구성되어 실험 목적에 따라 선택하여 사용할 수 있습니다.

 

Figure 1. Direct PCR from various mouse tissues. Lysates directly extracted from each tissue without any DNA purification were used as templates.

1: Heart, 2: Liver, 3: Large intestine, 4: Small intestine, 5: Kidney, 6: Stomach, 7: Ear, 8: Brain, 9: spleen, NTC: No template control.

 

 

 

 

  

 

Figure 2. Direct PCR from whole blood and saliva. Human whole blood or saliva  was used as the template for direct PCR without any pre-treatment.

Lane 1~10 : Amount of whole blood or saliva as the template (μl),

PTC: Purified genomic DNA, 10 ng was used as the template, NTC: No template control.

 

 

 

 

Figure 3. Direct PCR from various plant tissues. Lysates were directly extracted from each plant tissue without any DNA purification and used as the templates.

Direct PCRs were performed with a primer set specific for the chloroplast genome.

NTC : No template control.

 

 

 

 

 

 

Figure 4. Direct genotyping for selection of knock-out mice.

WT: Wild type mouse(339 bp), HZ: Heterozygotic mouse, KO: Knock-out mouse(589 bp), NTC: No template control.

 

 

 

 

 

Figure 5. Direct PCR for selection of transgenic plants. Lysates were directly extracted from each plant leaf  and used as the template for PCR detection of transgenic plants.

 

 

 

 

Figure 6. Direct PCR and RFLP analysis for Zebrafish genotyping. Target DNAs were amplified directly from zerafish’s fin without DNA purification.

RFLP analysis was done using a restriction enzyme (Rsa I).

Storage

• -20 ± 5 ℃

 

Shelf life

• 12 months